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    氨基柱的活化相关说明

    发布时间:2022-05-13浏览:41次
    氨基柱,全称氨丙基键合硅胶色谱柱,色谱柱家族中较灵活的色谱柱,不仅可以用于正反相还可以应用于离子交换(弱阴离子交换柱)中。但是需要注意的是,氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团更容易水解,所以要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险(建议水比例不超过40%)。所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。
     
    氨基柱的活化:
     
    对于新氨基柱,首先应详细阅读使用说明书,了解柱子出厂保存溶剂。一般出厂会保存在正相溶剂中,如果保存溶剂与将要使用的流动相极性不同不互溶,先用异丙醇过渡。过渡过程中应注意异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,应使用小流速过渡。
     
    当使用反相模式时,用前请使用异丙醇小流速过夜平衡色谱柱。流速建议0.1-0.2mL/min,之后再转换到100%乙腈冲洗20柱体积,然后转换到和流动相相同比例的不含盐的乙腈水体系冲洗20柱体积。
     
    当使用正相模式时,如与出厂保存溶剂互溶,可使用流动相直接冲洗20倍柱体积;如不互溶请用异丙醇过渡。
     
    注意事项:
     
    正相条件:正相使用时,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于还原糖的分析
    反相条件:pH值越低越有发生水解的危险,所以要严格控制pH范围,使其pH范围在2.0~8.0,通常建议使用范围:pH3.0~7.0比较合适;
    流动相中水相比例越高越有发生水解的危险,所以应尽量减少水在氨基柱上的保留,建议水相使用比例
    短时间内,氨基柱可保存在纯甲醇,乙腈或异丙醇中,若长时间不使用建议保存在异丙醇和正己烷试剂 中封存。
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